تشخیص ویروس موزاییک کدوییان به وسیله واکنش rt-lamp

thesis
abstract

ویروس موزاییک کدوییان متعلق به خانواده bromoviridae و جنس cucumovirus است که دارای دامنه میزبانی وسیعی است و در سراسر دنیا، بخصوص مناطق معتدل ومرطوب، گسترش دارد. این ویروس از نظر خسارت زایی به محصولات جالیزی در ایران در درجه دوم اهمیت بعد از سفیدک سطحی کدوئیان قرار دارد. در این تحقیق امکان استفاده از روش rt-lampبرای شناسایی سریع و دقیق ویروس موزاییک خیار مورد بررسی قرار گرفت و همزمان کارآیی آن با سایر روش های معمول در شناسایی این ویروس مانند rt-pcr و روش های سرولوژیکی مقایسه شد. برای این منظور ابتداء با استفاده ازآزمون های سرولوژیکی (das-elisa) وجود ویروس در نمونه های آلوده تایید شد. سپسrna ویروس از برگ های تلقیح شده گیاه محک(توتون) و نیز گیاه میزبان (کدو) استخراج گردید. از rnaاستخراج شده برای تولید cdna و متعاقبا انجام واکنش rt-pcr استفاده شد. همچنین از rnaویروس و cdna به ترتیب برای انجام واکنشlamp rt-یک مرحله ای و دو مرحله ای استفاده شد. در ادامه فاکتور های دخیل در واکنش rt-lampمانند غلظت آنزیم، dntps و سایر اجزاء مورد نیاز برای واکنش بهینه سازی شد. نتایج این تحقیق نشان داد که تکنیکrt-lamp را می توان با موفقیت برای شناسایی ویروس cmvاستفاده کرد. این تکنیک در مقایسه با سایر تکنیک های معمول تشخیص ویروس، مانند rt-pcrدارای سرعت(4 برابر)، حساسیت ( حدود 100 برابر) و دقت بیشتری است و نیاز به تجهیزات گران قیمت مانند ترموسایکلر ندارد و تشخیص نمونه های مثبت به راحتی و تنها با مشاهده کدورت ایجاد شده در تیوب های حاوی قطعات cdna ویروس امکان پذیر می گردد.

First 15 pages

Signup for downloading 15 first pages

Already have an account?login

similar resources

به کارگیری روش های مختلف تأیید انجام واکنش RT-LAMP جهت تشخیص ویروس پیچیدگی برگ سیب زمینی (PLRV)

بیماری پیچیدگی برگ سیب زمینی، از بیماری های مهم در مزارع سیب زمینی است که باعث کاهش عملکرد و کیفیت غده های سیب زمینی می شود. این بیماری توسط ویروس پیچیدگی برگ سیب زمینی ایجاد می شود. یکی از روشهای اولیه مدیریت آلودگی در محصولات سیب زمینی، استفاده از غده های عاری از ویروس به عنوان غده بذری برای کاشت است. روش های متعددی جهت تشخیص این ویروس وجود دارند که می توان به آزمون های سرولوژیک و روش جدیدی ج...

full text

شناسایی و تشخیص ویروس موزاییک معمولی لوبیا و موزاییک نکروتیک معمولی لوبیا با استفاده از روش Immunocapture RT-PCR

سابقه و هدف: در بین عوامل ویروسی متعددی که باعث بروز علایم موزاییک و ایجاد خسارت در گیاه لوبیا چیتی (Phaseolus vulgaris L. ) میشوند، دو ویروس موزاییک معمولی لوبیا BCMV و ویروس موزاییک نکروتیک لوبیا BCMNV اهمیت ویژه ای دارند . به منظور ردیابی این دو ویروس و تعیین برخی خصوصیات سرولوژیک و مولکولی آنها، در یک فصل زراعی نمونه هایی با علایم موزاییک ، رگبرگ روشنی ، برگشتگی ، نکروتیک برگ و ساقه لوبیا ج...

full text

ارزیابی آزمون تکثیر هم‌دمای وابسته به حلقه در شناسایی ویروس موزاییک کاهو (LMV)

شایع‌ترین ویروس تأثیرگذار بر کاهو در سراسر مزارع جهان، ویروس موزاییک کاهو (Lettuce mosaic virus; LMV) متعلق به خانواده Potyviridea و جنس Potyvirus است. روش‌های متعددی شامل آزمون‌های سرولوژیکی و مولکولی جهت تشخیص این ویروس وجود دارند، اما این روش‌ها زمان‌بر بوده و نیازمند ابزارهای پیچیده‌ای هستند. هدف از این پژوهش، کاهش زمان موردنیاز جهت تشخیص LMV با استفاده از روش تکثیر هم‌دمای وابسته به حلقه (...

full text

ارزیابی آزمون تکثیر هم‌دمای وابسته به حلقه در شناسایی ویروس موزاییک کاهو (LMV)

شایع‌ترین ویروس تأثیرگذار بر کاهو در سراسر مزارع جهان، ویروس موزاییک کاهو (Lettuce mosaic virus; LMV) متعلق به خانواده Potyviridea و جنس Potyvirus است. روش‌های متعددی شامل آزمون‌های سرولوژیکی و مولکولی جهت تشخیص این ویروس وجود دارند، اما این روش‌ها زمان‌بر بوده و نیازمند ابزارهای پیچیده‌ای هستند. هدف از این پژوهش، کاهش زمان موردنیاز جهت تشخیص LMV با استفاده از روش تکثیر هم‌دمای وابسته به حلقه (...

full text

ردیابی و شناسایی ویروس موزاییک یونجه (AMV) به وسیله آزمون تکثیر هم دمای وابسته به حلقه

ویروس موزاییک یونجه (Alfalfa mosaic virus, AMV) در ایران که سبب بیماری در محصول یونجه (Medicago sativa) می‌ شود، بر اساس خصوصیات مورفولوژیکی و بیان علایم شناسایی تشخیص داده می‌شود. روش های متعددی جهت تشخیص این ویروس وجود دارند که می توان به آزمون های سرولوژیک و روش‌های مولکولی اشاره کرد. آزمون نسخه برداری معکوس تکثیر هم دمای وابسته به حلقه (revers transcription loop mediated isothermal amplific...

full text

ردیابی و شناسایی ویروس موزاییک یونجه (AMV) به وسیله آزمون تکثیر هم دمای وابسته به حلقه

ویروس موزاییک یونجه (Alfalfa mosaic virus, AMV) در ایران که سبب بیماری در محصول یونجه (Medicago sativa) می‌ شود، بر اساس خصوصیات مورفولوژیکی و بیان علایم شناسایی تشخیص داده می‌شود. روش های متعددی جهت تشخیص این ویروس وجود دارند که می توان به آزمون های سرولوژیک و روش‌های مولکولی اشاره کرد. آزمون نسخه برداری معکوس تکثیر هم دمای وابسته به حلقه (revers transcription loop mediated isothermal amplific...

full text

My Resources

Save resource for easier access later

Save to my library Already added to my library

{@ msg_add @}


document type: thesis

وزارت علوم، تحقیقات و فناوری - دانشگاه زنجان - دانشکده کشاورزی

Hosted on Doprax cloud platform doprax.com

copyright © 2015-2023